如何調節激光共聚焦顯微鏡的激光強度: 激光強度有兩個調節因素:電源控制旋鈕(power control knob)、聲光可調諧濾波器(Acousto-Optical Tunable Filter, AOTF) 1. 電源控制旋鈕:一般設置成*大值的30%,輸出增大,激光器壽命將縮短,也將產生激光噪音,應先調節AOTF, PMT等以獲取*佳強度。 2.聲光可調諧濾波器:控制激發光光束及強度,可在毫秒級速度內開啟或關閉激光或調節其在0-100%之間進行變化。這樣就能對每個圖像點使用不同的激光光束,并選擇需要的強度。 工作原理:利用了聲波在各項介質中傳播時對入射到傳播介質中的布拉格衍射作用。當輸入一定頻率的射頻信號時,AOTF對入射多色光進行衍射,從中選出波長為入的單色光,單色光的波長與射頻頻率f有一一對應關系,只要通過電信號的調諧即可快速、隨機改變輸出關的波長。AOTF 實現激光強度連續調節,并有快速調節功能,實現局部刺激和掃描、快速波長切換(微秒級)在激光共聚焦顯微鏡,光電倍增管并不能增加激光的強度,但能調節*后成像的光電的強度,因此通過調節光電倍增管的電壓能夠調節圖像的亮度。另外,針孔(confocal pinhole)大小影響光子量,也可調節圖像的亮度。光電倍增管是一種對紫外光、可見光和近紅外光極其敏感的特殊真空管,能使進入的微弱光信號增強至原本的108倍,使光信號被測量。
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